Neospora caninum es un protozoo apicomplejo considerado como una de las principales causas de aborto en el ganado bovino en todo el mundo. Modelos estimativos del binomio coste/beneficio, consideran la vacunacion como la mejor opcion para el control de la neosporosis. Sin embargo, no existe actualmente una vacuna eficaz en el mercado. El objetivo general de este proyecto es la identificacion de los mecanismos diferenciales durante el ciclo litico de infeccion en aislados de baja y alta virulencia. El proposito final es la identificacion de factores de virulencia que podrian ser usados como candidatos vacunales, junto con otras proteinas ya estudiadas por nuestro grupo. Para su consecucion se plantean los siguientes objetivos especificos en un periodo de 3 años: objetivo 1: analisis del transcriptoma de aislados de n. Caninum de alta y baja virulencia: variaciones en la expresion de proteinas clave que intervienen en el ciclo litico del parasito. Este objetivo permitira la identificacion de nuevos elementos diferenciales en la expresion entre aislados y conocer los mecanismos clave implicados en la invasion y proliferacion del parasito en el hospedador. Objetivo 2: modulacion del trofoblasto y celulas dendriticas (cds) bovinas por aislados de n. Caninum de alta y baja virulencia: las cds y del trofoblasto bovinas son mediadores en la respuesta inmune innata frente a la infeccion y en la regulacion inmune local en placenta, respectivamente. Se estudiaran los efectos de la infeccion en estas lineas para identificar los posibles factores de patogenicidad del parasito y su relacion con la respuesta inmune del hospedador. Se abordaran los siguientes subobjetivos: 2.1: Perfil de la expresion de genes y produccion de citoquinas en cds y celulas del trofoblasto bovino infectadas por aislados de n. Caninum de alta y baja virulencia y 2.2: Cambios fenotipicos en las cds bovinas como consecuencia de la infeccion por aislados de n. Caninum de alta y baja virulencia. Objetivo 3: interaccion parasito-hospedador en la placenta entre aislados de n. Caninum de alta y baja virulencia en un modelo bovino gestante. Los resultados obtenidos in vitro se validaran in vivo realizando infecciones experimentales en el ganado bovino. El analisis comparativo entre la infeccion por aislados de n. Caninum de alta y baja virulencia revelara la relacion entre la respuesta inmune en la placenta y las consecuencias clinicas de la infeccion con el control de la transmision del parasito y su multiplicacion en la placenta y tejidos fetales. Se investigaran los efectos de la infeccion in vivo en la placenta-trofoblasto en distintas poblaciones celulares, el perfil de citoquinas, los factores de adhesion de monocitos y otros marcadores de la respuesta innata y la patogenesis. En resumen, la consecucion de los objetivos permitira obtener una valiosa informacion sobre los mecanismos implicados en la variabilidad intraespecifica de la virulencia en n. Caninum que podria compartir con otros apicomplejos de interes humano y animal, como plasmodium, toxoplasma o besnoitia. La informacion acerca de la regulacion de dos celulas diana de referencia por la infeccion sera de gran valor para comprender los mecanismos moleculares y celulares frente a patogenos intracelulares en esta especie domestica. Finalmente, los posibles factores de virulencia identificados en este estudio podran ser utilizados en el futuro proximo como candidatos vacunales en una vacuna polivalente